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進來輕松學會使用Dionex耗材
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更新時間:2019-10-08
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進來輕松學會使用Dionex耗材
制備的樣品在樣品瓶中混合不均勻或每次取樣時注射器對樣品產(chǎn)生玷污以及樣品揮發(fā)等都會影響出峰靈敏度的重復(fù)性。定量不重復(fù)由上述三種原因引起的可能性很大,而且都和進樣操作密切相關(guān),因此可一起進行檢查。只有在上述檢查后無異常發(fā)現(xiàn)時才轉(zhuǎn)入接下的Dionex耗材使用步驟。
Dionex耗材操作過程中需要注意的知識點:
1、避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使Dionex耗材從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料,因此在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)該緩慢進行,在閥進樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩。
2、應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,特別是反相色譜中,不應(yīng)直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬?,反之亦然?/div>
3、一般說來Dionex耗材不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時,才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會迅速降低柱效。
4、選擇使用適宜的流動相,以避免固定相被破壞。有時可以在進樣器前面連接一預(yù)柱,Dionex耗材是鍵合硅膠時,預(yù)柱為硅膠,可使流動相在進入Dionex耗材之前預(yù)先被硅膠“飽和”,避免Dionex耗材中的硅膠基質(zhì)被溶解。
5、避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi),需要對樣品進行預(yù)處理或者在進樣器和Dionex耗材之間連接一保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。
6、經(jīng)常用強溶劑沖洗Dionex耗材,清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進行清洗時,對流路系統(tǒng)中流動相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡,每種流動相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右,即常規(guī)分析需要50-75ml。